DIGITALNA ARHIVA ŠUMARSKOG LISTA
prilagođeno pretraživanje po punom tekstu
ŠUMARSKI LIST 11-12/1998 str. 7 <-- 7 --> PDF |
J. Rosa: UTJECAJ FOSFOGIPSA IZ INDUSTRIJSKOG ODLAGALIŠTA NA HRAST LUŽNJAK (Querem mhur) Šumarski list br. II 12, CXXH (1998). 491-506 Tretman je trajao 24 sata. Nakon tretmana dio korjenčića je fiksiran, dok je drugi dio materijala prebačen u vodovodnu vodu na 24-satni oporavak te zatim fiksiran. Utvrđivanje neposrednog citotoksičnog utjecaja odlagališta fosfogipsa na tijek mitoze i pojavu kromosomskih aberacija proveden je na sijancima žireva sakupljanih sa stabala uz samo odlagalište i isklijavanih u laboratoriju. Kao kontrola upotrijebljeni su sijanci iskliljavani iz žireva sakupljenih u sjemenskoj sastojini. Za utvrđivanje količine fluorida upotrijebljeno je lišće hrasta lužnjaka ubranog u središnjem dijelu krošnje stabala neposredno uz odlagalište, te iz sjemenske sastojine. Korištena je potenciometrijska metoda koja se temelji na uporabi selektivne fluoridne elektrode s kristalom lantana koji daje elektrokemijski impuls na koncentraciji fluorida od 106 M. Morfološke promjene epikutikularnog voska analizirane su na uzorcima lišća stabala uz odlagalište i iz sjemenske sastojine u vegetacijskoj sezoni 1996. godine. Analizirana su 4 razvojna stadija lista i to lišće na početku vegetacijske sezone, uključujući listove iz sastava pupa, vrlo mlade i potpuno razvijene listove, kao i lišće s kraja vegetacijskog razdoblja. Analiza morfologije epikutikularnog voska na stomatalnom obrubu puci lišća hrasta lužnjaka provedena je skenirajućim elektronskom mikroskopijom (SEM). Radi ocjenjivanja stupnja degradacije kristalnog epikutikularnog voska (ThijsseiBass,l 990; B a č i ć i sur., 1996) određivana je relativna količina amorfnog voska u obliku krasta na stomatalnom obrubu prema sljedećim stupnjevima: 1. stupanj - puci s obrubom koji je prekriven samo s kristalnim (bez krasta) voskom. 2. stupanj - puci s obrubom koji je prekriven amorfnim voskom u količini od 1-20%. 3. stupanj - puci s obrubom koji je prekriven amorfnim voskom u količini od 21-60% 4. stupanj - puci s obrubom koji je prekriven amorfnim voskom u količini od 61 -80% 5. stupanj - puci s obrubom koji je prekriven amorfnim voskom u količini od 81 -100% Za svaku analiziranu puč odredenaje pripadnost jednom od navedenih stupnjeva. Stupnjevi od 1.- 4. su stupnjevi fuzije i aglomeracije kristalnog u amorfni vosak. Radi utvrđivanja statističkog odstupanja u mitotskoj aktivnosti u odnosu na kontrolu primijenjen je x2- test za analizu varijance. Kod usporedbe stupnjeva fuzije i aglomeracije kristalnog u amorfni epikutikularni voska (kraste) na lišću hrasta lužnjaka uz odlagalište i u kontroli, korištenje test sa slijedovima (run-test). Radi se o neparametarskom testu za usporedbu dvaju uzoraka kod kojeg nije potrebno poznavati razdiobu populacije. 3. REZULTATI Results Tretiranje korjenskih meristemskih stanica klijanaca hrasta lužnjaka različitim koncentracijama vode iz odlagališta fosfogipsa, rezultiralo je pojavom tri tipa kromosomskih aberacija: 1. Aberacije na razini kromosoma a) lutajući kromosomi b) mikronukleus 2. Aberacije na razini diobenog vretena a) c - mitoza b) višepolarnost diobenog vretena 3. Subkromatidne aberacije a) sljepljenost kromosoma Citotoksično djelovanje istraženo je utvrđivanjem ukupnog broja kromosomskih aberacija i mjerenjem mitotske aktivnosti. Mitotska aktivnost ili mitotski indeks (M.I.) iskazana je kao broj stanica u diobi u odnosu na ukupni broj ispitivanih stanica. Kod tretmana uzoraka različitim koncentracijama fosfogipsa uočena je općenito slaba diobena aktivnost meristemskih stanica (tablica 1). Najaktivnija dioba stanica odvijala se kod tretmana 2,5 %-tnom koncentra čijom kod koje je M.I. bio 3,59%. Tretman većim koncentracijama (5 i 10%) doveo je do značajnog smanjenja mitotske aktivnosti. Analiza je pokazala daje mitotska aktivnost kod meristemskih stanica u svim koncentracijama bila niža od mitotske aktivnosti kontrolnog uzoraka kod kojeg je iznosila 4,34%. Nakon 24 sata tretmana, ukupan broj kromosomskih aberacija bio je značajan u odnosu na kontrolni uzorak kod kojeg nije uočena pojava kromosomskih aberacija. Povećanjem koncentracije do 5% povećavala se mitotska aktivnost, a i broj aberacija bio je dvostruko veći. Nakon tretmana 5 i 10%-tnom otopinom mitotska aktivnost se smanjila, kao i broj kromosomskih aberacija. Uočene su aberacije na razini diobenog vretena i kromosoma (tablica 2). Poremećaji diobenog vretena očitovali su se u velikom broju c-mitoza (slika 1 a), posebice kod koncentracije od 2,5% te lutajući kromosomi (slike lc, d, e). Uočeno je također sljepljivanje kromosoma (slika lf), te mikronukleusi, kao siguran pokazatelj eliminacije kromosomskog materijala. Pojava mikronukleusa uočena je samo kod koncentracije od 1,0%. (Tablica 2). |